- Оценка радиопротекторных свойств эвкалипта в условиях острого лучевого поражения
- Эфирные масла при длительном воздействии малых радиационных доз
- Эфирные масла и резервные возможности костного мозга животных при хроническом радиационном облучении
- Радиопрофилактический аромакурс
За последние 50 лет на территории бывшего СССР неоднократно имели место факты крупномасштабного радиоактивного загрязнения местности и связанные с ними факты радиационного воздействия на громадные контингенты людей. Да и сегодняшняя печальная ситуация в Японии в который раз заставляет нас задуматься о своей безопасности.
Население загрязненных территорий подвергается воздействию радиации. Состояние здоровья населения в некоторых из этих регионов приблизилось к критическому уровню. Поэтому поиск эффективных радиозащитных препаратов на сегодняшний день – весьма актуальная задача и весьма перспективными в этом плане видятся эфирные масла, ввиду того что они обладают:
- иммуностимулирующей активностью,
- выраженным бактерицидным действием широкого спектра;
- весьма значительной антиоксидантной активностью;
- противовоспалительным и гипосенсибилизирующим действием;
- способностью стимулировать синтез ДНК, клеточную пролиферацию, ингибировать проницаемость цитоплазматических мембран;
- положительно влиять на дыхательную, сердечно-сосудистую, центральную, нервную, эндокринную и ферментную системы.
Исследованиями показано, что курс ароматерапии при смертельных дозах облучения животных стимулировал иммунный ответ, способствовал увеличению количества ядросодержащих клеток, повышению уровня окислительной активности и окисляемости липидов, снижению тяжести эндогенной инфекции и повышению выживаемости до 53,8 % против 7,7 % в контроле (при наблюдении в течение 30 дней).
В отличие от известных протекторов радиопротекторный эффект эфирных масел регистрируется и при хроническом облучении. Они могут использоваться как индивидуально, так и массово во время отдыха и работы. Стоимость профилактических мероприятий крайне низкая.
Эфирные масла перспективны главным образом как радиопрофилактические, а в комплексе с другими известными средствами и как радиотерапевтические средства массовой защиты против действия внешнего ионизирующего облучения.
Оценка радиопротекторных свойств эвкалипта в условиях острого лучевого поражения.
ЭМ эвкалипта содержит многоатомные спирты: цинеол, карвакрол и др., ранее не использовавшиеся для радиопрофилактики. ЭМ эвкалипта разрешено Фармкомитетом для применения в медицине, используется как антисептическое средство в виде ингаляций при заболеваниях верхних дыхательных путей [Машковский М.Д., 1987]. Средство проверено в лабораторных условиях путем постановки опытов на мышах линии CBA/lac и гибридах F2(CBA×C57BL) массой 25 г обоего пола.
Тотальное облучение в диапазоне летальных доз проводили на рентгеновской установке РУМ-17, фильтр комбинированный, мощность дозы 0,32 Гр/мин.
Средство применяли следующим образом, мышей ежедневно на 40 мин помещали в камеру, где они дышали воздухом, содержащим ЭМ в концентрации 20 мг/м3. Процедуры проводили в течение 10 дней и прекращали за день до облучения.
Дозу и длительность воздействия ЭМ определяли в предварительных экспериментах с учетом его влияния на показатели иммунной системы, поскольку известно определяющее значение состояния иммунной системы в развитии бактериальных осложнений после радиационных поражений, являющихся причиной сокращения продолжительности жизни. Диапазон концентраций, оказывающих иммуномодулирующее действие — 20—90 мг/м3. При этих концентрациях признаки токсического поражения внутренних органов и аллергических реакций не были выявлены.
Радиозащитный эффект оценивали по интегральному показателю — 30-дневной выживаемости животных при дозе ЛД 90—100/30 и средней продолжительности жизни животных. Для более полной характеристики динамики гибели вычисляли процент погибших с 1-го по 7-й день (7 %), с 8-го по 14-й день (14 %), с 15-го по 30-й день (21 %). Результаты радиопрофилактического действия ЭМ эвкалипта приведены в табл. 13.
Таблица 13. Радиопрофилактическое действие эвкалипта
Группа животных |
Показатели радиационного поражения, % |
|||
7 день |
14 день |
21 день |
30 день |
|
Контроль |
0 |
84,6 |
7,7 |
92,3 |
Опыт |
0 |
38,46 |
7,69 |
46,15 |
Полученные данные позволяют рассматривать ЭМ эвкалипта как радиопротектор.
Эфирные масла при длительном воздействии малых радиационных доз
Работа выполнена на мышах-самцах гибридов FL(CBA×C57BL6) массой 16—18 г. Животных содержали в условиях вивария при смешанном освещении на стандартной диете.
Гуморальный иммунный ответ оценивали по числу антителообразующих клеток в селезенке на 5-е сутки после иммунизации. Использовали метод локального гемолиза в геле агарозы (Ерне и Нордин). Учитывали число АОК на всю селезенку и на 106 спленоцитов. В качестве антигена использовали тимусзависимый антиген — эритроциты барана в оптимальной дозе (2-108 клеток на мышь). Антиген вводили внутривенно в 0,5 мл среды 199.
Облучение экспериментальных животных выполняли на аппарате РУМ-17. Источник излучения Со-60, фокусное расстояние — 15 см , фильтры — Аl и Сu. Мощность облучения — 108 R в 1 мин.
При анализе радиопротекторного действия эфирных масел их ингалировали животным, помещенным в замкнутое пространство. Время ингаляции — 20 мин. С помощью ароматизатора-дозатора создавали заданную концентрацию 0,2; 0,4; 0,6 мг/м3. Использовали: лаванду, пихту, мяту, базилик.
Условия эксперимента: реакция гуморального иммунного ответа на дозированное внешнее облучение в малых дозах; динамика силы иммунного ответа у мышей, перенесших облучение в дозе 0,2 Гр; радиопротекторный эффект при дозированном хроническом облучении в малых дозах.
На первом этапе исследования была выявлена зависимость силы иммунного ответа от дозы облучения. При этом исследовали реакцию гуморального компонента иммунного ответа на дозированное внешнее облучение в малых дозах. В качестве контрольных животных были использованы интактные мыши, ибо манипуляции, связанные с облучением (подсадка мышей в контейнеры и пр.), существенно не влияли на иммунный ответ (табл. 14).
Оказалось, что однократное внешнее облучение в малых дозах способно изменить иммунный ответ (табл. 15).
Облучение в дозах 0,4 и 0,6 Гр приводило к супрессии иммунного ответа, а облучение в дозе 0,2 Гр не сопровождалось ограничением накопления АОК. Однако последующие исследования показали, что облучение, даже однократное в допустимой дозе аварийного обслуживания, сопровождается угнетением антителообразования в динамике пострадиационного периода (табл. 16).
Таблица 14. Гуморальный иммунный ответ на эритроциты барана ннтактных мышей и мышей, подвергнутых ложному облучению
Группа животных |
Число опытов (и мышей) |
Количество АОК |
|
на селезенку |
на 106 спленоцитов |
||
Интактные |
2(11) |
46 282 |
103 |
Ложнооблученные |
2(10) |
48 183 |
124 |
Таблица 15. Реакция гуморального компонента иммунного ответа на однократное дозированное внешнее облучение в малых дозах
Группа животных |
Число опытов (и мышей) |
Количество АОК |
|
на селезенку |
на 106 спленоцитов |
||
Интактные |
2(13) |
36 303 |
78 |
Доза 0,2 Гр |
2(12) |
33 164 |
97 |
Доза 0,4 Гр |
2(12) |
22 676 |
67 |
Доза 0,6 Гр |
2(11) |
23 288 |
59 |
Таблица 16. Динамика силы иммунного ответа у животных, перенесших внешнее равномерное облучение в дозе 0,2 Гр
Сутки послеоблучения |
Группа животных |
Число опытов(и мышей) |
Количество АОК |
|
на селезенку |
на 106 спленоцитов |
|||
1 |
Контроль Опыт |
2(11)
|
33 474
|
99
|
4 |
Контроль Опыт |
2(10)
|
25 276
|
51
|
8 |
Контроль Опыт |
2(11)
|
19 520
|
104
|
Супрессия гуморального иммунного ответа после однократного внешнего облучения в дозе 0,2 Гр была зарегистрирована на 4-е сутки пострадиационного периода.
На втором этапе исследования животных ежедневно подвергали воздействию ионизирующего излучения в течение 20 дней до суммарной дозы, равной эффективной допустимой дозе аварийного обслуживания человека, способной, судя по представленным выше данным, обусловить развитие иммунодепрессии (0,2 Гр), отчетливо регистрируемой на 4-е сутки пострадиационного периода. Мышей опытной группы перед облучением ингалировали композицией в течение 20 мин в заданных концентрациях. В качестве контроля использовали животных, получивших только ингаляцию. Иммунизацию проводили по схеме на 7-е, 15-е и 21-е сутки. Опыт дублирован. В использованных группах мышей число животных колебалось от 10 до 14.
Хроническое дозированное облучение в течение 20 дней до суммарной дозы, равной эффективной допустимой дозе аварийного обслуживания человека, сопровождалось иной динамикой модуляции функции иммунной системы по сравнению с таковой при однократном облучении в равной дозе (0,2 Гр).
Супрессия антителообразования в ответ на антигенную стимуляцию эритроцитами барана при хроническом дозированном облучении регистрировалась в тот период, когда при остром однократном облучении наблюдается стимуляция гуморального иммунного ответа, в частности на 7—8-е сутки. Очевидно, репаративные процессы в иммунной системе при хроническом дозированном облучении, имеющие клеточную природу, оказывались существенно подавленными. Ингаляция эфирными маслами в дозах 0,4 и 0,6 мг/м3 способна обеспечить иммунопротективный эффект, возможно, через стимуляцию репаративных процессов. В селезенке мышей, получавших ингаляции, накапливалось достоверно большое АОК по сравнению с их числом у мышей, подвергнутых только облучению. На 15-е сутки хронического дозированного облучения различия не столь демонстративны.
В основе феномена стимуляции антителогенеза при дозированном хроническом равномерном облучении, регистрируемого по числу АОК на миллион спленоцитов на 15-е сутки облучения, лежит, возможно, не только стимуляция репаративных процессов, например усиленная миграция стволовых кроветворных клеток в органы иммуногенеза из костного мозга, но и угнетение Т-супрессоров. Следовательно, есть основание предположить, что ингаляции могут реализовать свой иммунопротективный эффект не только на уровне стволовой кроветворной клетки, но и на уровне регуляторных популяций Т-лимфоцитов, снимая, например, ограничение функции Т-лимфоцитов-супрессоров. С достоверностью можно только сказать, что ежедневные ингаляции композицией в дозах 0,4—0,6 мг/м3 в течение 7 дней до иммунизации и 5 дней после иммунизации способны обеспечить иммунопротективный эффект при хроническом равномерном дозированном облучении малыми дозами, не превышающими суммарной дозы 0,12 Гр.
Эфирные масла и резервные возможности костного мозга животных при хроническом радиационном облучении.
В работе использованы самцы мышей гибридов FL(CBA×C57BL6) 3-месячного возраста. Хроническое радиационное облучение в малых дозах воспроизводили на аппарате РУМ-17 ежедневно в дозе 0,2 Гр в течение 25 дней. Все животные были разделены на три группы: 1-я группа — интактные мыши, 2-я группа — контрольные (подвергнуты только облучению), 3-я группа — опытные (получавшие сразу после облучения ингаляции РАВ). Ингаляции проводили в течение 20 мин вгерметически замкнутом объеме. Использовали природную концентрацию РАВ — 0,2 мг/м3. В качестве ароматического вещества применяли масло лаванды. Из каждой группы для исследования брали по 5 мышей.
Исследовали периферическую кровь. Каждые 5-е сутки учитывали число лейкоцитов, эритроцитов, подсчитывали лейкоцитарную формулу. Кровь забирали при декапитации.
Прежде всего следует отметить, что не только однократное внешнее облучение в допустимой дозе аварийного обслуживания (0,2 Гр) сопровождается модуляцией гуморального иммунного ответа в динамике пострадиационного периода: в первые 4 сут регистрируется его снижение, а на 8-е сутки — повышение. Ежедневные воздействия ионизирующим излучением до суммарной дозы, которая в 3 раза меньше 0,2 Гр, ограничивают регенеративную способность костного мозга как источника иммунокомпетентных клеток и иммуногенез (табл. 17).
Таблица 17. Гуморальный иммунный ответ на эритроциты барана у мышей, перенесших хроническое дозированное равномерное облучение в суммарной дозе 0,07 Гр
Период исследования (сутки) |
Группа животных |
Число опытов (и мышей) |
Количество АОК |
|
на селезенку |
на 106спленоцитов |
|||
7—8-е |
Контроль Опыт |
2(12)
|
18 067
|
129
|
С учетом приведенных данных не вызывает сомнений, что использование в дальнейших исследованиях хронического дозированного равномерного облучения малыми дозами (в частности, ежедневное облучение в дозе 0,2 Гр) в течение 25 дней можно рассматривать в качестве модели хронической лучевой болезни. Гематологически она проявляется постепенно развивающейся лейкопенией, эритроцитозом, абсолютной лимфопенией (табл. 18) и ограничением резервных возможностей костномозгового кроветворения, например в условиях повышенной нагрузки на эритропоэз, индуцированной гипоксической гипоксией (табл. 19).
Эфирные масла в природных концентрациях заметно «снимают» отмеченные патологические сдвиги, что наиболее отчетливо проявляется с 20-х суток наблюдения (табл. 20). На 25-е сутки показатели крови мышей опытной группы практически не отличаются от таковых интактных мышей.
Эффект эфирных масел реализуется на уровне костного мозга, ибо резервные возможности его у этой группы мышей сохраняются, о чем свидетельствует усиление эритропоэза в ответ на гипоксическую гипоксию. В контрольной группе количество эритроцитов в периферической крови животных после гипоксии не изменяется, в то время как в опытной группе регистрируется достоверное увеличение числа эритроцитов (табл. 21).
Таблица 18. Показатели клеточного состава периферической крови мышей при хронической лучевой болезни
Сутки от начала облучения |
Группа животных |
Показатели крови |
||
лейкоциты, 109/л |
эритроциты, 1012/л |
лимфоциты, 109/л |
||
5-е |
Интактные Контрольные |
6,05
|
3,9
|
3,33
|
10-е |
Интактные Контрольные |
9,3
|
4,7
|
5,3
|
15-е |
Интактные Контрольные |
6,1
|
4,4
|
3,2
|
20-е |
Интактные Контрольные |
7,0
|
2,9
|
3,9
|
25-е |
Интактные Контрольные |
5,3
|
3,4
|
3,8
|
Таблица 19. Количество эритроцитов в периферической крови мышей интактной и контрольной групп, перенесших гипоксическую гипоксию
Период исследования |
Группа животных |
Количество эритроцитов, 1012/л |
Исходный |
Интактные Контрольные |
3,9
|
5-е сутки после гипоксии* |
Интактные Контрольные |
4,7
|
* Гипоксическую гипоксию воспроизводили «поднятием» мышей в барокамере на «высоту» 10 000 м с «площадкой» в течение 5 мин.
Таблица 20. Показатели клеточного состава периферической крови мышей при сочетанном действии иронического облучения и ингаляции РАВ
Сутки от начала облучения |
Группа животных |
Показатели крови |
||
лейкоциты, 109/л |
эритроциты, 1012/л |
лимфоциты, 109/л |
||
20-е |
Интактные Контрольные Опытные |
7,0
|
2,9
|
3,9
|
25-е |
Интактные Контрольные Опытные |
5,3
|
3,4
|
3,8
|
Таблица 21. Количество эритроцитов в периферической крови мышей опытной и контрольной групп, перенесших гипоксическую гипоксию
Период исследования |
Группа животных |
Количество эритроцитов, 1012/л |
Исходный |
Интактные Контрольные Опытные |
3,9
|
5-е сутки после гипоксии |
Интактные Контрольные Опытные |
4,7
|
Материалы В. В. Николаевского
Научные исследования доказали у эфирных масел радиопротекторное действие, реализуемое на уровне костномозгового кроветворения.
Основной точкой приложения радиопротекторного действия являются плюрипотентная стволовая клетка или ее ближайшие потомки — коммитированные клетки-предшественники.
Если Вы заботитесь о своем здоровье, то проведите радиопрофилактический аромакурс:
Курс аромаванн с жемчужинами «Анти-стресс» 10-14 процедур, через день (продолжительность первой аромаванны 3 мин, последующих - по 10 мин).
При отсутствие противопоказаний к приему ванн проведите курс ежедневных распылений композиций «За верность Арго», «В добрый путь», «Иммунный щит». На курс 21 процедура. Время распыления 20 мин.
Чтобы создать необходимую концентрацию ароматов в воздухе помещения, используют такой расчет: 1 капля эфирного масла соответствует 23-24 мг ароматического вещества. Действующая концентрация - 1 мг эфирного масла на 1 м3 - для взрослых и 0,5 мг на 1 м3 - для детей. На 20 м2 площади при стандартной высоте потолка необходима 1 капля композиции в аромалампу или УЗ- распылитель.